1.泵頭密封圈的磨損

　　2.進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子密封圈的磨損

　　3.析出的緩沖鹽

　　4.樣品中的復(fù)雜易吸附基質(zhì)

　　其實(shí)，在工作過(guò)程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導(dǎo)致的色譜柱背壓升高問(wèn)題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會(huì)有所改善，因?yàn)檩^低的PH系統(tǒng)會(huì)降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。

　　液相色譜柱如何預(yù)防損壞措施

　　1、在液相系統(tǒng)中加入在線過(guò)濾器

　　在線過(guò)濾器的內(nèi)部顆粒空隙一般是0.5微米，對(duì)于UHPLC會(huì)選擇0.2微米空隙的在線過(guò)濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過(guò)濾篩板尺寸接近或者略小。

　　所以，在線過(guò)濾器能夠有效的阻隔來(lái)自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過(guò)濾篩板的堵塞。

　　注意：但是對(duì)于非常低死體積的液相系統(tǒng)，在線過(guò)濾器的加入可能會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴(yán)重的問(wèn)題。而對(duì)于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會(huì)有太大變化。

　　2、在柱子前端使用保護(hù)柱

　　保護(hù)柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。

　　因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料，所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。

　　注意：由于保護(hù)柱中可能有大量的強(qiáng)保留組分，在用強(qiáng)溶劑清洗系統(tǒng)時(shí)請(qǐng)取下保護(hù)柱，以防止這些強(qiáng)保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護(hù)柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會(huì)對(duì)分離效果有影響

　　3、對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理

　　有一些液相的分析方法沒有明確標(biāo)注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾。

　　在實(shí)際工作中，色譜柱的儲(chǔ)存也會(huì)影響柱子的使用壽命。那么對(duì)于色譜柱的儲(chǔ)存，也有以下建議：

　　短期儲(chǔ)存時(shí)

　　應(yīng)該保存在接近常用的流動(dòng)相條件下。并且，一定要移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。

　　長(zhǎng)期儲(chǔ)存時(shí)

　　將色譜柱按照說(shuō)明書的要求保存在對(duì)應(yīng)的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中取下兩頭用堵頭堵死。